对于惰性甲状腺乳头状癌（PTC）的治疗，主动监测（AS）是手术干预之外的一种可行替代方案，有助于减少不必要治疗的发生。然而，由于缺乏更可靠的诊断标志物，主动监测的广泛应用受到了限制。本研究旨在明确惰性与进展性甲状腺乳头状癌之间的差异，为生物标志物研发及治疗策略制定寻找新的靶点。

2025年3月，昆明医科大学第一附属医院甲状腺外科团队在Journal of Experimental &Clinical Cancer Research发表题为”Single-cell transcriptomics analysis reveals that the tumor-infiltrating B cells determine the indolent fate of papillary thyroid carcinoma”文章。

肿瘤浸润 B 细胞（TIL-B），尤其是生发中心 B 细胞（GC-B），在惰性甲状腺乳头状癌（PTC）中更为富集。这类细胞在惰性和进展性病例中均能抑制甲状腺细胞增殖，但惰性 PTC 招募外周 B 细胞的能力更强。在惰性病例中，肿瘤浸润 B 细胞增殖能力增强，并在三级淋巴结构（TLS）内形成聚集。PTPRC-CD22 相互作用被证实是肿瘤浸润 B 细胞增殖的潜在驱动因素。与生发中心 B 细胞相关的标志物（如 LMO2）被认为是惰性甲状腺乳头状癌潜在的诊断和预后指标。

本研究揭示了早期甲状腺乳头状癌（PTC）的细胞图谱特征，明确了惰性与进展性病例在肿瘤及免疫微环境方面的独特差异。这些发现深化了对惰性甲状腺乳头状癌生物学机制的理解，并为开发可靠的诊断及预后生物标志物提供了支撑。

实验部分

在该研究中，TissueGnostics 相关产品和技术主要用于开展多重免疫荧光染色实验与结果分析，是验证肿瘤浸润 B 细胞（TIL-B）分布特征及三级淋巴结构（TLS）形成的核心工具，具体作用如下：

1. 多色荧光标记

研究采用了 TissueGnostics 的 TSA多色荧光标记系统用于对甲状腺乳头状癌（PTC）组织切片进行多标志物染色。同时检测组织中 B 细胞标志物（CD20、CD21）和 T 细胞标志物（CD4、CD8），以明确免疫细胞的空间分布关系。为后续观察 TLS 结构（B 细胞聚集并被 T 细胞包围的特征）提供了技术基础。

2. 组织成像与定量分析

使用TissueFAXS 成像系统进行图像采集，并通过 StrataQuest 软件 进行定量分析：

• 对染色后的组织切片进行高分辨率扫描，捕捉肿瘤区域及癌旁组织中免疫细胞的分布图像（如图 3C 所示），清晰呈现惰性 PTC 中 TLS 的形成及进展性 PTC 中 B 细胞的分散分布。

• 通过 StrataQuest 软件量化关键指标，包括：肿瘤区域内 CD20⁺ B 细胞的比例（图 3E）；三级淋巴结构（TLS）的数量（图 3D）；细胞密度、标志物表达强度等参数，为两组 PTC 的免疫微环境差异提供客观数据支持。

3. 核心研究结论的验证支撑

Tissue Cytometry技术的应用直接验证了单细胞测序的关键发现：

• 惰性 PTC 肿瘤内部存在 B 细胞聚集形成的 TLS 结构，而进展性 PTC 中 B 细胞仅分布于癌旁组织，无 TLS 形成；

• 惰性 PTC 中 CD20⁺ B 细胞比例显著高于进展性 PTC，进一步证实 TIL-B 细胞在惰性 PTC 中的富集特征。

Figure 3 肿瘤浸润 B 细胞（TIL-B）在两组甲状腺乳头状癌（PTC）中均能抑制甲状腺细胞增殖，但仅在惰性 PTC 中聚集形成三级淋巴结构（TLS）

C 对惰性（I1、I2）和进展性（P）PTC 的肿瘤组织（白色虚线框内）及癌旁组织进行多重免疫荧光分析，检测 B 细胞和 T 细胞的分布位置。三级淋巴结构（TLS）的特征为 B 细胞聚集且被 T 细胞包围，该结构仅存在于惰性 PTC 的肿瘤区域。

D 直方图显示惰性和进展性 PTC 肿瘤区域内三级淋巴结构（TLS）的数量。

E 直方图显示惰性和进展性 PTC 肿瘤区域内 CD20⁺ B 细胞的比例。